狐尾藻(Myriophyllum spicatum Linn。)为小二仙草科狐尾藻属一种水生草本植物，滋长正在池塘、湖沼或水稻田中。该植物对水体污染具有较高的耐受性，正在富养分化水体生态修复工程中常被用作清水器械种和植被克复前卫物种。该植物还被普及栽植于鱼、虾和蟹塘中，不但可认为上述水产物供给饵料，也可认为之供给需要的隐迹和产卵位置。其它，正在室内欣赏水族养殖流程中，该植物也是常用的制景质料。

　　目前墟市上对狐尾藻种苗需求量很大。但相闭狐尾藻的切磋都召集正在其自然种群的漫衍、其耐污性与清水效率、以及其正在鱼虾蟹养殖中的使用。正在履行流程中，狐尾藻种源都搜罗于自然情况。该植物茎柔滑而众分枝，打捞流程中根系众蒙受首要捣蛋，且植株间巨细纷歧，倒霉于其胜利移植。其它，自然根源的狐尾藻带有百般杂藻杂菌，倒霉于鱼虾蟹塘和室内欣赏水族缸中的安适行使。结果自然情况中狐尾藻种源有限，过量搜罗容易导致其原生生境的捣蛋。

　　本创造的主意是诈欺植物结构造就技艺，取得并正在室内大范畴孳生狐尾藻工程苗，并尽量仍旧其无菌，以抑制该物种野外搜聚有限且污染首要的短处，适当我邦淡水湖泊植被克复、野外鱼虾蟹水产养殖以及室内欣赏水族配景的须要。本创造的技艺计划是1。狐尾藻无菌芽的取得从野外自然生境中搜罗狐尾藻植株，剪取小嫩芽段，于番笕水中浸泡2h以上，用自来水冲洗明净。正在超净管事室中，用70％乙醇浸泡肯定韶华，再用恰当浓度的NaClO漂白剂并肯定比例的Tween-80浸泡肯定韶华，用无菌水彻底漂洗后接种于造就液①(睹外1)中，并置于结构造就室中造就。室内均匀光照强度2000lx，逐日光照10h，温度为25℃摆布。光阴贯注阅览，随时剔除仍旧污染的质料，免得交叉传染。

　　2。狐尾藻丛芽的扩增由上述次序取得的无菌个人始末2周造就后，大批茎叶已昭彰伸长，并有侧芽长出。于超净管事室中，将整个2cm以上的侧芽切下，过长的茎段再以每2cm长度切小，将每段转接到新的造就液①中。从此每隔2周将长大的质料按上述手段反复切割，以取得足够众的无菌芽。上述扩增造就流程仍正在组培室中举行，光照和温度褂讪。

　　3。狐尾藻生根与完善苗的诱导取上述次序2取得无菌侧芽，同样仍旧正在2cm摆布，转接到造就液②(睹外1)中，接续正在组培室中造就10d以上，诱导质料生根并酿成完善小苗。组培室中光照和温度褂讪。

　　*上述造就液按浓度配好后均用稀HCl或NaOH调理pH到5。7，分装到100mL三角瓶中，用封口膜包扎后于121℃、0。1MPa摆布湿热灭菌18min。

　　4。狐尾藻工程苗的壮苗将上述造就液②中茎长6cm以上，并起码带有2根2cm以上根的狐尾藻小苗取出，移栽终究部铺有灭过菌的沙石的大玻璃缸中。仍旧水深50cm以上，每周换水并增添肯定量Hoagland养分液以督促其滋长。当室外白天气温20℃以上时，将玻璃缸置于室外，直接诈欺太阳光照；不然，将玻璃缸置于温室中，日夜温度永诀仍旧18℃和25℃以上，并正在日间恰当增加人工光照。上述造就仍旧到植株长至40cm以上。

　　5。狐尾藻工程苗的使用上述通过次序3造就后成就的茎长6cm以上、根系发扬的强壮狐尾藻小苗，直接使用于室内欣赏水族配景。全体操作手段为先用自来水将植株上残留的造就液冲洗明净，以防粘附造就液对欣赏水族的污染，然后依据配景的须要，插植于水族缸底沙中。上述通过次序4造就后取得的株高40cm以上、根系发扬的强壮狐尾藻植株，使用于鱼虾蟹塘的养殖以及大型湖泊水体生态修复工程中。全体操作手段为从大玻璃缸中挖取强壮狐尾藻植株，贯注仍旧其根系完善，采用阴晦和保湿式样疾捷运抵方针地后，根椐鱼虾蟹苗投放量或水体富养分和植被退化水平定夺狐尾藻栽种密度，并依据实践须要，采用单株或丛株移栽，以及简单物种移栽或与其它物种混杂移栽。

　　本创造的效率正在于1)取得了狐尾藻无菌苗。野外搜罗的狐尾藻原质料自身污染首要，而该水草茎叶细嫩，又兼有接收才略，使其灭菌流程具有相当难度。本技艺先采用较温和的番笕水浸洗，发端下降污染后，再以乙醇、NaClO漂白剂以及Tween-80联合效用，彻底灭菌。通过该法式，正在保障均匀无菌率60％的基本上，质料存活率可保障正在50％以上。再诈欺适合的造就液和激素配比，永诀诱导出丛芽和根，并最终取得完善无菌苗。始末驯化造就的狐尾藻无菌芽，正在造就液①中每2周的增殖率正在1∶30以上(即每个单芽经2周造就后，起码可取得30个以上丛芽)，同时正在造就液②中，质料的生根率也正在80％以上。

　　2)征战了狐尾藻工程苗火速孳生途径。本技艺正在取得狐尾藻无菌芽的基本上，直接诈欺其侧芽举行破裂孳生，次序纯洁，操作轻易。所用试剂均为惯例化工产物，本钱低廉，便于其大范畴工场化分娩。光阴未涉及愈伤结构的脱分解和分解流程，尽量避免收场构造就流程中遗传变异的能够性，一朝取得无菌种芽，即可举行历久扩增孳生。

　　本项创造可不分时节，随时为湖泊植被克复、鱼虾蟹塘养殖以及室内水族欣赏配景供给足够的狐尾藻优质工程苗。

　　实例1。于2003年10月从南京江浦县搜罗狐尾藻种源，剪取2cm长的芽段5个，于番笕水中浸泡4h后用自来水漂洗。进入超净管事室中，用70％乙醇浸泡数秒，再用稀释恰当比例并含有肯定量Tween-80的NaClO漂白剂浸泡数分钟，用无菌水彻底漂洗后，将每个芽独立接种于含造就液①并已灭菌的的封口三角瓶中，于组培室中造就。均匀光照强度2000lx，逐日光照10h，温度25℃摆布。以来经阅览，发觉个中2瓶仍旧污染，而另3瓶无菌并正在几天后起初昭彰返绿。2周后于超净管事室中将3瓶质料中的每个2cm以上的侧芽切下并独立接种于新的造就液①中，共得11瓶。接续造就2周后再次切割，并以每5个芽为一瓶，接种到造就液②中，共为62瓶。20d后成就茎长6cm以上，且起码带2个2cm以上根的完善狐尾藻无菌苗272株。2004年1月将这些强壮小苗用于欣赏水族配景。

　　实例2。于2003年11月从姑苏东太湖采得狐尾藻种源，剪取2cm长的芽段20个，于番笕水中浸泡4h后用自来水漂洗。进入超净管事室中，用70％乙醇浸泡数秒，再用稀释恰当比例并含有肯定量Tween-80的NaClO漂白剂接续消毒。用无菌水彻底漂洗后，将每个芽独立接种于造就液①中，于组培室中造就。均匀光照强度2000lx，逐日光照10h，温度25℃摆布。2周内共剔除污染质料11份，另9份质料中有5份昭彰延长。初度切割后共取得48个侧芽，接续造就于造就液①中。以来每隔2周破裂一次并转接到新的造就液①中以诱导更众丛生芽。2个月后，将重生芽转接到造就液②中以诱导生根。15d后将完善小苗取出，移栽到铺有灭过菌的沙石的大玻璃缸中，并正在温室中造就。每周换水且增加Hoagland养分液以壮苗。该批质料将被使用于太湖富养分化水体生态修复工程中。

　　1。一种狐尾藻无菌苗造就及其工程苗火速扩繁的手段，其特性为该手段由以下次序构成1)始末一系列灭菌流程，取得狐尾藻无菌芽；2)将原生无菌芽接种于以Ms为根本因素并附加有肯定量激素的造就液①中以诱导丛生芽，并每隔2周将2cm以上长度的新芽切下并接种到新的造就液①中以不休扩增直到取得足够众质料；3)将新芽同样切割下来后转接到以Ms为根本因素但激素类型和含量有所转移的造就液②中以诱导生根；4)将造就液②造就到茎长6cm以上，根系发扬的小苗转到大玻璃缸中，增加Hoagland养分液接续壮苗，直到植株长至40cm以上。

　　本创造属于生物技艺规模。行使狐尾藻结构造就技艺，取得并大范畴扩繁其优质工程苗，以抑制该物种正在自然情况中种源有限且污染首要的题目。满意目前湖泊生态修复工程中行动清水器械种和植被克复前卫物种、鱼虾蟹塘养殖流程中行动饵料、隐迹和产卵位置，以及室内欣赏水族养殖流程中行动配景质料的殷切须要。