[0001] 本发觉属于植物机闭提拔手艺规模，全部涉及重水植物奥古狐尾藻的组培和迅速 滋生手腕，该手腕是诈骗统统无菌和肃穆的控温手段，杀青了重水植物正在尝试室豪爽临蓐， 并能够施行到生态情况修复。

　　[0002] 奥古狐尾藻属于被子植物门（Angiospermae)双子叶植物纲（Dicotyledoneae)小 二仙草科（Haloragidaceae)。目前湖泊生态修复工程中举动清水东西种和植被光复前卫物 种、鱼虾蟹塘养殖历程中举动饵料、逃亡和产卵场地，以及室内赏玩水族养殖历程中举动布 景资料的急迫须要。使用机闭提拔手艺，取得并大范围扩繁其优质工程苗，以战胜该物种正在 自然情况中种源有限且污染主要的题目。

　　[0003] 目前闭于狐尾藻机闭提拔的报道较量众，然则除了穗花狐尾藻外都没有全部落实 到是何种狐尾藻。况且闭于奥古狐尾藻的心理生化，以及生态学方面的报道都额外特别。虽 然它有狐尾藻属的配合性格，然则其本身的特征也导致组培的体例和前提有改变。

　　[0004] 本发觉供应了一种奥古狐尾藻机闭提拔与迅速滋生手腕。该手腕是正在无菌前提 下，选用控温手段，赐与固定光照，提拔无菌苗系统，可终年供应豪爽无菌小苗。手腕易行， 操作便当，产量高。

　　[0007] A、外植体选拔与预管制：选拔成长健旺，颜色鲜绿，无病虫害的茎段举动外植体， 用碱性洗涤剂浸泡30min，再正在自来水下冲洗2h，用蒸馏水几次冲洗4-5次，用无菌水再反 复冲洗4-5次，置于无菌操作台。

　　[0008] B、外植体灭菌：正在无菌操作台上起初用70% (体积比）乙醇浸泡15s，用无菌水冲 洗4-5次，再用0。1% (质料体积比）氯化汞实行外外消毒2-5min，无菌水冲洗4-5次，放 入0。15% (质料体积比）的无菌柠檬酸溶液中切割，正在无菌滤纸大将水吸干，待用。

　　[0009] C、愈伤机闭和芽诱导：将0。 5_2cm的去除叶片的步调B中的奥古狐尾藻外植体接 入诱导提拔基中，于光照提拔箱中静置提拔，诱导愈伤机闭和小芽。

　　[0011] D、增殖提拔：可陆续运用步调C的提拔基，用于增殖提拔。也可待小芽成长到 I。 5-2cm，调动增殖提拔基，进一步扩充滋生，变成小苗。

　　[0013] 每隔20-25d继代一次，变成的小苗，切成0。 5-2。 0cm，转入诱导提拔基或增殖提拔 基，正在与步调D肖似提拔前提下陆续实行增殖提拔，扩繁植株；

　　[0014] E、生根：愈伤机闭陆续成长，小苗成长到4-6cm阁下，能够不调动提拔基陆续正在步 骤C的提拔基上长出根，也能够调动为生根提拔基，不只可煽动其生根，也可加快成长。

　　[0015] 所述的生根提拔基为：1/2MS液体提拔基+NAA0。 10mg/L+蔗糖1。 5%，pH 5。 8-6。 0。F、炼苗和移栽：待大概根长至2。Ocm以上时，掀开瓶盖，室温下炼苗l-2d后，取出 试管苗，洗净其根部提拔基，移栽至室外水体中。

　　[0040] 本发觉供应的奥古狐尾藻机闭提拔与迅速滋生手腕，可正在短期供应豪爽的小苗， 为进一步对奥古狐尾藻的心理生化特色的研宄供应源源陆续的资源。通过愈伤机闭的传代 更易于存储和支柱种植资源的质料。一个长Icm的茎段源委一周的提拔，能行成一块面积 为0。 25cm2的愈伤机闭，再经三周的提拔可取得6-8个小苗，每个小苗长5-8cm，增殖倍数达 到6-8倍，一年一个芽可滋生数亿棵以上小苗。以一个芽20d继代一次，每次的增殖倍数为 8计较。

　　1。 一种奥古狐尾藻机闭提拔与迅速滋生手腕，其步调是： A、 外植体选拔与预管制：选拔成长健旺，颜色鲜绿，无病虫害的茎段举动外植体，用碱 性洗涤剂浸泡30min，再正在自来水下冲洗2h，用蒸馏水几次冲洗4-5次，用无菌水再几次清 洗4-5次，置于无菌操作台； B、 外植体灭菌：正在无菌操作台上起初用70%体积比乙醇浸泡15s，用无菌水冲洗4-5 次，再用0。 1%质料体积比氯化汞实行外外消毒2-5min，无菌水冲洗4-5次，放入0。 15%质料 体积比的无菌柠檬酸溶液中切割，正在无菌滤纸大将水吸干，待用； C、 愈伤机闭和芽诱导：将0。 5-2cm的去除叶片的步调B中的奥古狐尾藻外植体接入诱 导提拔基中，于光照提拔箱中静置提拔，诱导愈伤机闭和小芽； 所述的诱导提拔基为：MS固体提拔基+6BA 0。 50-2。 00mg/L+NAA 0。 25-0。 50mg/L+蔗糖 3%质料体积比，pH 5。8-6。 0 ； D、 增殖提拔：可陆续运用步调C的提拔基，用于增殖提拔；也可待小芽成长到 I。 5-2cm，调动增殖提拔基，进一步扩充滋生，变成小苗； 所述的增殖提拔基为：1/2MS液体提拔基+ 6BA 0。 50-2。 00mg/L+NAA 0。 25-0。 50mg/L+ 蔗糖 I。 5%，pH 5· 8-6。 0 ； 每隔20-25d继代一次，变成的小苗，切成0。 5-2。 0cm，转入诱导提拔基或增殖提拔基， 正在与步调D肖似提拔前提下陆续实行增殖提拔，扩繁植株； E、 生根：愈伤机闭陆续成长，小苗成长到4-6cm阁下，能够不调动提拔基陆续正在步调C 的提拔基上长出根，也能够调动为生根提拔基； 所述的生根提拔基为：1/2MS液体提拔基+NAA 0。 10mg/L +蔗糖1。 5%，pH 5。 8-6。 0 ； F、 炼苗和移栽：待大概根长至2。 Ocm以上时，掀开瓶盖，室温下炼苗l-2d后，取出试管 苗，洗净其根部提拔基，移栽至室外水体中； 以上步调C，D，E均为无菌情况，光照40-60 μ E/ (m2 · s)，光照周期为12h/d，室内温度 25±2°C。

　　2。 按照权力请求1所述的手腕，其特色正在于：步调B中氯化汞的消毒工夫为2min ；步调 C和D中，6BA的浓度为0· 50mg/L，NAA的浓度为0· 25mg/L。

　　【专利摘要】本发觉公然了一种奥古狐尾藻机闭提拔与迅速滋生手腕，其步调是：A。外植体选拔：选拔成长健旺，颜色鲜绿，无病虫害的植物茎举动外植体。B。外植体灭菌：用酒精和氯化汞管制外植体。C。芽诱导：选拔最佳的激素配比诱导芽成长。D。增殖提拔：安排激素配比和提拔基浓度实行增殖提拔。E。生根：选拔适当的细胞成长素实行生根诱导。F。炼苗和移栽：正在提拔箱中掀开瓶口提拔两天，正在转入自然水体中提拔。该手艺能够不受时令和情况局限，提拔出豪爽无菌苗，供水生生态体例光复之用。

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